胱抑素CElisa試劑盒采用雙抗體夾心法進(jìn)行檢測
胱抑素CElisa試劑盒是一種低分子量的蛋白質(zhì),由人體有核細(xì)胞以恒定速率產(chǎn)生,并通過腎小球自由濾過,是評估腎功能的重要指標(biāo)。胱抑素C ELISA試劑盒作為一種高靈敏度、特異性強(qiáng)的檢測工具,廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中。
胱抑素CElisa試劑盒采用雙抗體夾心法進(jìn)行檢測。具體步驟如下:
1.包被抗體:微孔板預(yù)先包被了特異性抗胱抑素C抗體。
2.加入樣本和標(biāo)準(zhǔn)品:將樣本或標(biāo)準(zhǔn)品加入微孔板中,樣本中的胱抑素C與包被抗體結(jié)合。
3.加入檢測抗體:加入標(biāo)記的抗胱抑素C抗體,與已結(jié)合的胱抑素C形成免疫復(fù)合物。
4.加入酶標(biāo)記物:加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親和素。
5.顯色反應(yīng):加入顯色底物TMB,在HRP催化下顯藍(lán)色,加入終止液后變?yōu)辄S色。
6.測量與分析:使用酶標(biāo)儀在450 nm波長處測量吸光度(OD值),胱抑素C濃度與OD值成正比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中胱抑素C的濃度。
胱抑素CElisa試劑盒特點(diǎn)與優(yōu)勢:
高靈敏度:具有高靈敏度,能夠檢測到低至0.04 ng/mL的胱抑素C。其檢測范圍為0.31-20 ng/mL。
特異性高:該試劑盒特異性識(shí)別樣本中的人胱抑素C,與類似物無明顯交叉反應(yīng)。這確保了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
重復(fù)性好:試劑盒的重復(fù)性好,板內(nèi)和板間變異系數(shù)均小于10%。這意味著在不同實(shí)驗(yàn)條件下,檢測結(jié)果具有高度的一致性。
操作便捷:整個(gè)檢測過程標(biāo)準(zhǔn)化,操作簡便,通常在3-4小時(shí)內(nèi)完成。這使得胱抑素C ELISA試劑盒非常適合高通量檢測。
應(yīng)用范圍:
1.腎功能評估:胱抑素C是評估腎小球?yàn)V過率(GFR)的理想標(biāo)志物,比肌酐更準(zhǔn)確。
2.疾病診斷:胱抑素C水平升高與心血管疾病、代謝綜合征等風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)。
3.藥物開發(fā):在藥物開發(fā)過程中,胱抑素C可作為生物標(biāo)志物,用于評估藥物對腎功能的影響。
胱抑素CElisa試劑盒實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)
1.樣本處理:樣本應(yīng)盡快檢測,如需長期保存,應(yīng)冷凍于-20℃或-70℃。
2.試劑準(zhǔn)備:所有試劑在使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫。
3.加樣準(zhǔn)確:使用微量加樣器準(zhǔn)確加入樣本和試劑,避免氣泡和交叉污染。
4.溫育條件:嚴(yán)格按照說明書規(guī)定的溫度和時(shí)間進(jìn)行溫育。
胱抑素CElisa試劑盒憑借其高靈敏度、特異性高、重復(fù)性好和操作便捷的特點(diǎn),已成為檢測胱抑素C濃度工具。它在腎功能評估、疾病診斷和藥物開發(fā)中發(fā)揮著重要作用。通過嚴(yán)格遵循操作步驟和注意事項(xiàng),研究人員和臨床工作者可以獲得準(zhǔn)確可靠的檢測結(jié)果,為相關(guān)領(lǐng)域的研究和應(yīng)用提供有力支持。
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