免費(fèi)代測大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2elisa試劑盒
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2elisa試劑盒僅適用于科研實驗、科學(xué)研究等領(lǐng)域,不得用于臨床診斷。
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2elisa試劑盒試驗原理
試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2elisa試劑盒經(jīng)驗技術(shù)是很重要的,常見的ELISA常見技術(shù)指南:
1.選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進(jìn)行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
2.ELISA實驗中為了確定信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實驗中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時,應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
3.標(biāo)準(zhǔn)品的配制:對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié),將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
4.一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml??衫脴?biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
5.為了優(yōu)化靈敏度,建議過夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。
6.若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7.巨噬細(xì)胞炎性蛋白2elisa試劑盒當(dāng)測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig。