綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
維涅蘭德固氮菌品牌 | Azotobacte | EY-J964361 |
資源名稱(chēng): 維涅蘭德固氮菌
種屬: Azotobacter│vinelandii
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 0003
生長(zhǎng)條件: 28℃
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線(xiàn)菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線(xiàn)菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線(xiàn)菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體Triptophenolide別名: 分子式: C20H24O3性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 抗炎;松香烷;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
雙特異性磷酶22抗體Siegeskaurolic acid別名: (16R)-17-Hydroxy-ent-kauran-19-oic acid分子式: C20H32O3性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 貝殼杉烷;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
Erdj5/DNAJC10蛋白抗體Isoleojaponin別名: 分子式: C20H26O3性狀: Oil純度: 96.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 益母草屬;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
腫瘤調(diào)亡素/腫瘤壞死因子受體死亡受體6抗體Sugeroside別名: Sugereoside; Abbeokutone 17-O-glucoside分子式: C26H42O8性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 貝殼杉烷;二萜苷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
跨膜TMIGD1蛋白抗體6β-Hydroxyhispanone別名: 6β-Hydroxy-15,16-epoxylabda-8,13(16),14-trien-7-one分子式: C20H28O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 半日花烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
軸絲中鏈動(dòng)力蛋白抗體10,11-Dihydro-24-hydroxyaflavinine別名: 分子式: C28H41NO2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 曲霉屬;對(duì)照品;標(biāo)準(zhǔn)品;微生物代謝產(chǎn)物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
軸絲動(dòng)力蛋白7抗體Taxcultine別名: Taxol D分子式: C44H53NO14性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 抗有絲分裂;活性;紅豆杉屬;紫杉烷;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
環(huán)指蛋白19抗體15,16-Epoxy-15-ethoxy-6β,13-dihydroxylabd-8-en-7-one別名: 分子式: C22H36O5性狀: Oil純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 半日花烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
維涅蘭德固氮菌品牌甘油三磷脫氫酶1抗體Monkey Smad1/MADH1 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 1) ELISA Kit
神經(jīng)節(jié)苷酯抗體Monkey LCN1 (Lipocalin 1) ELISA Kit
S轉(zhuǎn)移酶A3抗體Monkey CD30L (Cluster of Differentiation 30 Lligand) ELISA Kit
磷化GADD153抗體Monkey ADA (Adenosine Deaminase) ELISA Kit
G蛋白αS抗體(核苷結(jié)合蛋白Gα s)Monkey TXLNa (Taxilin Alpha ) ELISA Kit
G蛋白β4抗體/核苷結(jié)合蛋白β亞基4Monkey PLD2 (Phospholipase D2) ELISA Kit
G蛋白β2抗體/核苷結(jié)合蛋白β亞基2Monkey INSL5 (Insulin Like Protein 5) ELISA Kit
G蛋白γ2抗體/核苷結(jié)合蛋白γ2抗體Monkey FSH (Follicle-Stimulating Hormone) ELISA Kit