細(xì)胞名稱 樹鼩腎上皮樣細(xì)胞;TSHK3
形態(tài)特性: 上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雄性樹鼩的腎組織。2003年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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產(chǎn)品名稱 | 樹鼩腎上皮樣細(xì)胞;TSHK3 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63816 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。
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鐮狀瘧原蟲IgM抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞plasmodium falciparum antibody
趨化因子C-C-基元配體2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞Chemokine C-C-Motif Ligand 2
抗原215檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞Carbonhydrate Antigen 215
亮氨氨肽酶3檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞leucine aminopeptidase3
可溶性CD44分子檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞soluble CD44
嗜性粒細(xì)胞主要性蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞eosinophil major basic protein
細(xì)小病B19-IgG抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞Parvovirus B19-IgG antibody
JOE免疫因子檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞IOE Immune factors
CD47蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人癌細(xì)胞;BC-009形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞CD47 protein
促泌素檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人癌細(xì)胞;BC-020形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞secretogogue
硫代嘌呤S-甲基轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人癌細(xì)胞;BC-019形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞thiopurine S-methyltransferase polyclonal
絨毛膜α檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人癌細(xì)胞;BC-021形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞Chorionic Gonadotrophin α
乙型肝炎病19檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人癌細(xì)胞;BC-023形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞hepatitis B virus 19
P53抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人癌細(xì)胞;BC-022形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞P53 antibody
白細(xì)胞抗原DR檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人癌細(xì)胞;BC-024形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞HLA-DR
絲氨蛋白酶抑制因子3檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人癌細(xì)胞;BC-025形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞serpin peptidase inhibitor clade A
ACTG1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人癌細(xì)胞;BC-027形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞actin gamma 1
樹鼩腎上皮樣細(xì)胞;TSHK3麥迪、檢定培養(yǎng)基(普通瓊脂斜面培養(yǎng)基)規(guī)格:250g用途:麥迪(白)霉素效價測定
草鉀兔血漿規(guī)格:0.2ml*20用途:用于溶血性鏈球菌的檢驗
改良CCD瓊脂基礎(chǔ)(mCCDA)規(guī)格:250g用途:用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
馬丁肉湯培養(yǎng)基規(guī)格:250g拉丁屬名:Martin Broth Medium
遠(yuǎn)藤氏瓊脂規(guī)格:250g用途:用于濾膜法測定生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。
硫(100ug)規(guī)格:1ml/支*5用途:取一支添加于200ml亞硫鐵瓊脂中