細(xì)胞名稱 家兔腎細(xì)胞；RABK3
形態(tài)特性: 上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雌性家兔的腎組織。2006年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代；3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法（-）
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
家兔腎細(xì)胞；RABK3 | 貼壁生長 | EY-X63812 |
?
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
11,12-EET檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；KLE形態(tài)特性: 上皮樣；多角11,12-EET
14,15-EET檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人狀卵巢腺癌細(xì)胞；Caov-3形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣14,15-EET
糖類抗原125檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人卵巢腺癌細(xì)胞；SW626[SW626；SW-626]形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣CA125
神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人卵巢腺癌細(xì)胞；OVCAR-3形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Nerve growth factor induced protein
補(bǔ)體因子H抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞；W6/32形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣complement factor H Antibody
補(bǔ)體C3轉(zhuǎn)化酶抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 大鼠癌細(xì)胞；MADB106形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣C3 Convertase Antibody
金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白13抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠腹水瘤細(xì)胞；S-180-S2D9形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣A Disintegrin And Metalloprotease 13 Antibody
血管性血友病因子裂解酶抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 大鼠腎小球系膜細(xì)胞；HBZY-1形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣ADAMTS-13Ab
異亮氨檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠肝癌細(xì)胞；H22-H8D8形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Isoleucine
纈氨檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；LS174T[LS174T]形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Valine
血管非炎性蛋白2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人細(xì)胞；C-33A形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Non inflammatory protein 2
磷脂酰肌醇1磷檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞；RAW264.7[RAW264.7]形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣PIP1
基質(zhì)金屬蛋白酶檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠腹水瘤細(xì)胞；EAC-E2G8形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣matrix metalloproteinase
血清肌肽酶檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人肝腹水腺癌細(xì)胞；SK-HEP-1形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Serum Carnosinase
胱天蛋白酶12檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞；AR42J形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Caspase-12
鈣調(diào)蛋白激酶4檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞；HK-2形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Calmodulin kinase 4
細(xì)胞內(nèi)聚合酶檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；Caco-2形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Intracellular polymerase
家兔腎細(xì)胞；RABK3改良MSRV培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于沙門氏的分離培養(yǎng)
MS培養(yǎng)基（不含有機(jī)元素，不含瓊脂和蔗糖）規(guī)格：250g用途：用于植物組織培養(yǎng)（不含有機(jī)元素，不含瓊脂和蔗糖）
維生素C（抗壞血）規(guī)格：10g詳情介紹
瓊脂LT100規(guī)格：250g用途：用于食品中細(xì)菌計(jì)數(shù)
水稻赤霉菌培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于水稻中赤霉菌培養(yǎng)
牛血清白蛋白規(guī)格：10g詳情介紹
點(diǎn)擊放大
