綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強,培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
酪丁酸梭菌規(guī)格 | Clostridiu | EY-J963866 |
資源名稱: 酪丁酸梭菌
種屬: Clostridium tyrobutyricum
提供形式: 凍干管
安全等級: 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)丁酸
培養(yǎng)基: 生孢梭菌培養(yǎng)基:胰蛋白胨 10.0克 10.0克 葡萄糖 5.0克 5.0克 酵母膏 3.0克 醋酸鈉 3.0克 可溶性淀粉 1.0克 半 0.5克 瓊脂 0.5克 pH6.8±0.2,蒸餾水 1000ml
強化梭酸培養(yǎng)基,FT
傳代方法: ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。
②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件: 37℃,厭氧,
存儲條件: 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
蛋腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1α)(學發(fā)光免疫分析法)Atractylenolide III純度:≥98%
蛋白C抑制因子(PCI)(學發(fā)光免疫分析法)Anemoside A3 Pulchinenoside A3純度:95%
蛋白激酶Cε(PKCε)(學發(fā)光免疫分析法)EC純度:≥98%
蛋白酶激活受體2(PAR2)(學發(fā)光免疫分析法)ECG純度:≥98%
低密度脂蛋白(LDL)(學發(fā)光免疫分析法)EGCG純度:≥98%
低氧誘導因子1α(HIF1α)(學發(fā)光免疫分析法)Psoralidin純度:≥97%
低氧誘導因子1α(HIF1α)(學發(fā)光免疫分析法)Bavachin(補骨脂二氫黃)純度:97%
FANCD2 FANCD2抗體 * 0.1ml Ginsenoside F2
phosphoFANCD2(Ser222) FANCD2抗體 * 0.1ml Ginsenoside Rb1
FANCF 范可尼貧血相關(guān)蛋白F抗體 * 0.2ml Ginsenoside Rb2
FAM3B/PANDER 胰腺衍生因子抗體 * 0.2ml Ginsenoside Rb3
IMPDH2 5'脫氫酶2抗體 * 0.2ml Ginsenoside Rc
FAS/Apo1/CD95 載脂蛋白A1抗體 * 0.1ml Ginsenoside Rd
ANP32C 致瘤蛋白32相關(guān)蛋白1抗體 * 0.2ml Gliquidone
phosphoFAS (Tyr291) 載脂蛋白A1抗體 * 0.1ml Gliquidone
胰島素樣蛋白3(INSL3)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: INSL3 ELISA Kit
Mouse urokinase type plasminogen activator (uPA) ELISA Kit 型纖溶酶原激活物(uPA)酶聯(lián)免疫試劑盒
Mouseansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit 轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanCoisolELISAKit皮質(zhì)規(guī)格:48T/96T
細胞BMK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitBMP-7骨成型蛋白7規(guī)格:48T/96T
α/β干擾素受體(IFN-α/βR)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
α干擾素(IFN-α)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit Ierferon α,IFN-α ELISA Kit
熱休克蛋白27(HSP-27)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: HSP-27 ELISA Kit
Rabbitacetylcholinereceptoraibody,AChRab酶聯(lián)免疫試劑盒兔乙酰膽受體抗體(AChRab)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCP酶聯(lián)免疫試劑盒抗環(huán)胍氨肽抗體(CCP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKi骨成型蛋白4(BMP-4)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
酪丁酸梭菌規(guī)格E.coli O157/Gold 膠體金離子標記抗大腸埃希氏菌O157抗體IgG1號染色體開放閱讀框25抗體雙(二亞芐基)鈀Rat GR (Glucocorticoid Receptor) ELISA Kit
E.coli O157/Biotin 標記抗大腸埃希氏菌O157抗體IgG1號染色體開放閱讀框31抗體4,5-二甲氧基-3-苯甲Rat GRα (Glucocorticoid Receptor α) ELISA Kit
Dysferlin/FITC 熒光素標記Dysferlin蛋白抗體IgG1號染色體開放閱讀框51抗體4,5-二甲氧基-3-苯甲Rat GRβ (Glucocorticoid Receptor β) ELISA Kit
EPEC/E.coli /Biotin 化兔抗腸致病性大腸桿菌抗體IgG1號染色體開放閱讀框52抗體4-溴-2-(基)苯甲Rat GC (Glucagon) ELISA Kit
E.coli/Biotin 化兔抗普通大腸埃希菌菌體蛋白抗體IgG1號染色體開放閱讀框67抗體4-溴-2-(基)苯甲Rat GCK (Glucokinase) ELISA Kit
E2F1/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體IgG1號染色體開放閱讀框83抗體4-羥基-2-Rat gp130 (Glucoprotein 130) ELISA Kit
E2F2/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體IgG富含半胱氨分泌蛋白3抗體4--2-Rat G6PD (Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase) ELISA Kit
E2F3/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體IgG腫瘤/抗原26抗體4--2-Rat GLUT3 (Glucose Transporter 3) ELISA Kit