公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
肺粘液上皮樣癌細(xì)胞；NCI-H292 | 貼壁生長 | EY-X63385 |
細(xì)胞名稱 肺粘液上皮樣癌細(xì)胞；NCI-H292
形態(tài)特性: 上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞株源自肺支氣管黏液上皮樣癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶；先用成份限定的培養(yǎng)基分離得到，然后換成含血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)。培養(yǎng)條件下該細(xì)胞保留了黏液上皮的特性，可從其超微結(jié)構(gòu)的表現(xiàn)和多種鱗狀上皮分化標(biāo)記的表達(dá)而判斷。該細(xì)胞支持HBV的生長，脫羧酶陰性。該細(xì)胞可以作為篩選模型，將人類亞基因組片段轉(zhuǎn)染入細(xì)胞來研究HBV及其自身基因在病毒性肝炎和肝癌發(fā)生中的作用。該細(xì)胞角蛋白、波形蛋白、黏液洋紅染色陽線，但神經(jīng)絲三聯(lián)蛋白陰性。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法: 1:3~1:8傳代；2~3天換液1次。
傳代情況: P84
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法（-）
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用4-溴-2-甲基吡啶Human SCNN1A ELISA Kit
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣；BOS-6注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用4-溴-2-甲基吡啶Human SCNN1G ELISA Kit
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣；BOS-5拉丁屬名: Bacillus megaterium3-氨基噻吩－2－羧酸甲酯Human SCO1 ELISA Kit
婆羅門牛皮膚成纖維樣；BOS-4拉丁屬名: Fusarium oxysporum3-氨基噻吩－2－羧酸甲酯Human SCP2 ELISA Kit
婆羅門牛皮膚成纖維樣；BOS-3拉丁屬名: Pseudomonas nitroreducens3-氨基噻吩－2－羧酸甲酯Human SCO2 ELISA Kit
大額牛皮膚成纖維樣；BOS-2拉丁屬名: Bacillus zhejiangensisMethyl 6-hydroxy-5-nitropyridine-3-carboxylateHuman SCNN1G ELISA Kit
猴yuan拉丁屬名: Ganoderma sinense1-對磺酰咪唑Human SCO2 ELISA Kit
非洲綠猴腎；GL-37拉丁屬名: Aspergillus flavus1-對磺酰咪唑Human SCO1 ELISA Kit
非洲綠猴腎；VERO-76注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用(S)-(+)-1,2-異亞基甘油Human SCLY ELISA Kit
猴腎；vero IgRCD4-注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用(S)-(+)-1,2-異亞基甘油Human SCT(Secretin) ELISA Kit
猴腎；Vero IgCD4拉丁屬名: Ophiocordyceps sinensis(S)-(+)-1,2-異亞基甘油Human SCMH1 ELISA Kit
長尾綠猴腎；4647注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用4,6-二甲基-2-巰基嘧啶Human SCML1 ELISA Kit
長尾綠猴
肺粘液上皮樣癌細(xì)胞；NCI-H292犬孕激素/孕(PROG)ELISA試劑盒HSP-40ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬*狀腺原氨(T3)ELISA試劑盒hSP-60ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒hSP-60ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬雙氫睪(DHT)ELISA試劑盒HSP-60ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬維生素A(VA)ELISA試劑盒HSP-60ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬維生素E(VE)ELISA試劑盒Hsp-70ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬維生素K1(VK1)ELISA試劑盒hSP-70ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
犬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒Hsp-70ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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