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產(chǎn)品名稱 | 豚鼠心肌細(xì)胞;GP-H1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63753 |
細(xì)胞名稱 豚鼠心肌細(xì)胞;GP-H1
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雄性豚鼠的心臟組織。2003年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P4
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
Tamarixin
CAS No.:27542-39-8
中文名:檉柳素-3-O-葡萄糖苷
分子式:C22H22O12
貝素 訂購|咨詢 催產(chǎn)素受體(OXTR) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
河豚素 訂購|咨詢 催產(chǎn)素受體(OXTR) 規(guī)格: HPLC≥99%,1mg/vial
瑞鮑迪甙 A 訂購|咨詢 催乳素(PRL) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
原蘇木素B(原巴蘇木素) 訂購|咨詢 催乳素(PRL) 規(guī)格: HPLC≥98%,10mg/vial
魯斯可皂苷元 訂購|咨詢 催乳素(PRL) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
芳樟 訂購|咨詢 催乳素(PRL) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial
人參皂苷 F2 訂購|咨詢 催乳素(PRL) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
異綠原 A 訂購|咨詢 催乳素(PRL) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
麝香 訂購|咨詢 催乳素受體(PRLR) 規(guī)格: GC≥98%;0.15ml/vial
雙去氧基姜黃素 訂購|咨詢 催乳素誘導(dǎo)蛋白(PIP) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
(3S,6E,10S)6,10二基 訂購|咨詢 催乳素誘導(dǎo)蛋白(PIP) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
紫堇靈 訂購|咨詢 微小染色體維持缺陷蛋白2(MCM2) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
紫莖女貞苷B 訂購|咨詢 微小染色體維持缺陷蛋白5(MCM5) 規(guī)格: 10mg
新苷 訂購|咨詢 微纖絲關(guān)聯(lián)蛋白4(MFAP4) 規(guī)格: 20mg
土大黃苷 訂購|咨詢 微纖絲關(guān)聯(lián)蛋白4(MFAP4) 規(guī)格: 20mg
β,β二基酰紫草素 訂購|咨詢 微腦脂1(MCPH1) 規(guī)格: 20mg
L 訂購|咨詢 微球粒蛋白1(MCRS1) 規(guī)格: 20mg
5羥基色 訂購|咨詢 微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(MTTP) 規(guī)格: 20mg
CDC3/CDC10/Septin 7 細(xì)胞周期調(diào)控因子3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium phosphate, monobasic, anhydrous
CEP55 中心體蛋白55kDa抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium lauroyl sarcosine
CEP97 中心體蛋白97kDa抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ammonium acetate
CHMP4B/CHMP4C 染色質(zhì)修飾蛋白4B(4C)抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Cellulose, Microcrystalline
CKAP2 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白2/腫瘤和微管相關(guān)蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml alphaLactose, monohydrate
DCTN3 動力蛋白激活蛋白亞基3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Calcium chloride, dihydrate
DCTN6 動力蛋白激活蛋白6抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ethylene glycol
FMN2 形成素2抗體(成蛋白) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Magnesium sulfate, heptahydrate
馬來那敏標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Brompheniramine Maleate
S腺苷L高半胱標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:SAdenosylLHomocysteine
拉相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
戊雌二標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Estradiol Valerate
二四基秋蘭姆標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Disulfiram
相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:
標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Allantoin
芐星頭孢匹林標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Cephapirin Benzathine
蒼白松果菊標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:
吡酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:150mg 英文名稱:Topiramate
豚鼠心肌細(xì)胞;GP-H1含100ml 緩沖蛋白胨水(BPW)均質(zhì)袋規(guī)格:90ml/袋*10用途:用于阪崎桿菌的定量
改良月桂基硫鹽胰蛋白胨肉湯-,(mLST-Vm)規(guī)格:250g用途:用于阪崎桿菌選擇性增菌培養(yǎng)
含0.2%可溶性淀粉的BCP脫脂奶粉平板計(jì)數(shù)培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于食品中嗜熱菌芽孢計(jì)數(shù)(SN標(biāo)準(zhǔn))
SDAY培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于真菌的分離培養(yǎng)
改良番茄汁培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于食品中乳菌總數(shù)測定
羅藥敏紙片規(guī)格:15μg/片,20片/瓶拉丁屬名:Roxithromycin (ROX)