產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
匙形古柏線蟲探針法PCR熒光定量試劑盒 | Cooperia punctata | EY00P8843 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標(biāo)準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標(biāo)準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
N-甲基-2-戊PALCAM添加劑/PALCAM Supplement Abscisic acid,S-ABA
2-萘鹽酸鹽Half Fraser添加劑/Half Fraser Supplement PEPSIN
酸溶液(和化混合溶液)/Iodine(Potassium Iodide Mixed Solution) Ribonuclease A from bovine pancreas
2-溴-3-氯-5-硝基吡啶50%卵黃鹽水/50%卵黃乳液/50% Egg-Yolk Solution Andarine
乙酸鉍(III) (metals basis)卵黃溶液/Egg-Yolk Polymyxin B Solution PEPSIN
6-溴-1,2,3,4-四氫喹啉亞碲酸鹽卵黃增菌液/Egg-Yolk lurite Emulsion Proteinase K
N-苯基氨基乙酸乙基NZYM瓊脂/NZYM Agar Proteinase K
3-溴-2,6-二氟甲苯NZYM肉湯/NZYM Broth Chymostatin
2,3-二氟-6-甲氧基苯甲NZM瓊脂/NZM Agar Leupeptin
溴乙酰氯NZM肉湯/NZM Broth Pepstatin A microbial
6-氨基糖精NZCYM瓊脂/NZCYM Agar L-(-)-Fucose
3-(4-甲氧苯基)-3-羰基酸甲酯NZCYM肉湯/NZCYM Broth Pectinase
1-芐基-4-哌啶甲苞肉牛肉粒/皰肉牛肉粒/Dried Meat Particle beta-Amylase
2-溴-3-酚亞硫酸鉍指示劑/BSI/Bismuth Sulfite Indicator beta-Amylase
間氯甲酸叔丁酯SOB肉湯/SOB Broth Deoxyribonuclease
匙形古柏線蟲探針法PCR熒光定量試劑盒甲狀旁腺激素(PTH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)帕 質(zhì)量規(guī)格:FMB Grade6次/盒
多功能蛋白聚糖(VS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)帕 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級,>60 U/mg,10 mg/ml
血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸洛哌丁 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
V-Jun肉瘤病癌基因同源物(JUN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸洛哌丁 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級6次/盒
V-Jun肉瘤病癌基因同源物(JUN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸洛哌丁 質(zhì)量規(guī)格:分子量5,000~7,000,分子生物學(xué)級3×1ml
V-Fos-FBJ骨肉瘤病癌基因同源物(FOS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸洛哌丁(標(biāo)準品) 質(zhì)量規(guī)格:CP3×1ml
V-Fos-FBJ骨肉瘤病癌基因同源物(FOS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)酮咯酸氨丁三 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級500 ml
胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)酮咯酸氨丁三 質(zhì)量規(guī)格:FMB Grade