細胞名稱 肺轉化細胞;AE1201
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C6
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
肺轉化細胞;AE1201 | 貼壁生長 | EY-X63696 |
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Picrinine
CAS No.:4684-32-6
中文名:鴨腳樹葉
分子式:C20H22N2O3
豆蔻甘油三酯;Tritetradec 訂購|咨詢 脂素1(LPIN1) 規(guī)格: 20mg
七葉皂苷 Ib;Escin Ib 訂購|咨詢 脂素2(LPIN2) 規(guī)格: 10mg
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素;Artemisinin 訂購|咨詢 脂氧素A4(LXA4) 規(guī)格: 20mg
檸檬苦素;Limonin 訂購|咨詢 脂蛋白a(Lpa) 規(guī)格: 20mg
川芎嗪;Tetramethylpyr 訂購|咨詢 脂蛋白a(Lpa) 規(guī)格: 20mg
秋水仙苷;Thiocolchicosi 訂購|咨詢 脂蛋白關聯(lián)脂酶A2(LpPLA2) 規(guī)格: 20mg
六氫羧;DLPipecolini 訂購|咨詢 脂蛋白關聯(lián)脂酶A2(LpPLA2) 規(guī)格: 20mg
科羅索;Corosolic acid 訂購|咨詢 脂蛋白關聯(lián)脂酶A2(LpPLA2) 規(guī)格: 20mg
肌; Isitol 訂購|咨詢 脂蛋白關聯(lián)脂酶A2(LpPLA2) 規(guī)格: 20mg
槲皮素3OβD葡糖糖7O 訂購|咨詢 脂蛋白脂酶(LIPD) 規(guī)格: 20mg
槲皮苷;Quercitrin 訂購|咨詢 脂蛋白脂酶(LIPD) 規(guī)格: 20mg
格列風內酯;Griffonilide 訂購|咨詢 脂蛋白脂酶(LIPD) 規(guī)格: 20mg
佛手柑內酯;Bergapten 訂購|咨詢 脂聯(lián)素(ADP) 規(guī)格: 20mg
冬綠苷;Gaultherin 訂購|咨詢 脂聯(lián)素(ADP) 規(guī)格: 20mg
蛋;LMethionine 訂購|咨詢 脂聯(lián)素(ADP) 規(guī)格: 20mg
橙黃決明素6葡萄糖苷; 訂購|咨詢 脂聯(lián)素(ADP) 規(guī)格: 10mg
川芎嗪;Tetramethylpyraz 訂購|咨詢 脂聯(lián)素(ADP) 規(guī)格: 30mg
AUTS2 孤獨癥易感基因2蛋白抗體(自閉癥相關蛋白1) 現(xiàn)貨供應 0.2ml Disulfiram
RABX5/Rabex5 G蛋白相關RABX5抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Myricetin
PPAPDC3 脂酶2結構域3抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Myricetin
CCDC69 卷曲螺旋結構域蛋白69抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Deoxycholic acid
CCDC50 卷曲螺旋結構域蛋白50抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml βCyclodextrin
CCDC98 卷曲螺旋結構域蛋白98抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Ramipril
CCDC47 卷曲螺旋結構域蛋白47抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Ramipril
CCDC70 卷曲螺旋結構域蛋白70抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml
羧噻吩青 進口、國產 英文名稱:Ticarcillindisodiumsalt 含量:BR,85%
羧 進口、國產 英文名稱:Pyrazinecarboxamide 含量:BR
羧肽酶A(牛胰) 進口、國產 英文名稱:CarboxypeptidaseA 含量:高純,95%
羧肽酶Y(酵母) 進口、國產 英文名稱:CarboxypeptidaseY(Yeast) 含量:細胞培養(yǎng)級,85%
臺盼藍 進口、國產 英文名稱:Trypanblue 含量:超純,99%
苔紅素 進口、國產 英文名稱:Orcein 含量:AR,85%
肽聚糖 進口、國產 英文名稱:PGN 含量:BR
肽鏈端解酶 進口、國產 英文名稱:Peptidase 含量:BR,92%,三水物
鈦黃 進口、國產 英文名稱:Titanyellow 含量:生物技術級
鈦異酯 進口、國產 英文名稱:TPT 含量:超純,99%
肺轉化細胞;AE1201支原體瓊脂基礎培養(yǎng)基規(guī)格:BR50g詳情介紹
Hanks氏病保存液(pH7.4-7.6)規(guī)格:3ml*36支/盒用途:用于hanks病的保存
L-賴氨鹽鹽規(guī)格:25g用途:微生物指示劑
乳桿菌選擇性肉湯規(guī)格:250g用途:用于軟桿菌增菌培養(yǎng)
L-鼠李糖規(guī)格:20支詳情介紹
CDC厭氧菌瓊脂規(guī)格:1用途:0.01g每支含量