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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1
 
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產(chǎn)品名稱:
正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1
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產(chǎn)品特點(diǎn):
正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1相關(guān)產(chǎn)品:
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  正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1的詳細(xì)資料:

公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

生長(zhǎng)特性

貨號(hào)

正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1

貼壁生長(zhǎng)

EY-X63900

細(xì)胞名稱  正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1
形態(tài)特性: 成肌細(xì)胞

生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)

特征特性: 肌成纖維基質(zhì)細(xì)胞株,WPMY-1,與RWPE-1cells(ATCCCRL-11609)一樣,來(lái)源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質(zhì)細(xì)胞。通過(guò)一個(gè)pRSTV質(zhì)料結(jié)構(gòu),用SV40大T抗原對(duì)基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行永生化。WPMY-1細(xì)胞,與RWPE-1細(xì)胞及其它上皮細(xì)胞衍生株一樣,屬于來(lái)源于同一個(gè)前列腺的一系列細(xì)胞株。由于它們來(lái)源于同一個(gè)前列腺的周圍區(qū)域,WPMY-1細(xì)胞株對(duì)于研究分泌和基質(zhì)與上皮細(xì)胞相互作用尤其有用。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,5%

傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

傳代情況: P(41+5)

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè): 陰性
?
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;XYCDY-1BV-1E6形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Cyclin-dependent kinase 4

表皮生長(zhǎng)因子受體3檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;HE4-2B8形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Epidermal growth factor receptor 3

神經(jīng)肽Y受體Y1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;14853-1hz-5/C377形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣NPY1R

神經(jīng)肽Y受體Y2檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;HL-003HumanNormalCervicalEpithelialcellHNCE/HL-003形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣NPY2R

蛋白酶3抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;W5形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Protease 3 antibody

M型磷脂酶A2受體抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;CR-M01形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣M phospholipase A2 receptor antibody

神經(jīng)肽檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;8G3-B5-SP20形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣neuropeptide

組蛋白H1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;6B3-C5-SP20形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Histone H1

胰島素樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白2檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;3553-1hz-6M456/4B7_111202形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Insulin-like growth factor 2-mRNA binding protein 2

序列相似家族19成員A5檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;3553-1hz-6M456/1J4_111128形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Family With Sequence Similarity 19, Member A5

EB病早期抗原檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;5737-1RE-4M4/4N5_111218形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Epstein-Barr Virus early antigen

EB病核心抗原檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;5163-1RE-4M1234/4L17_111016形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣EBNA

血清粘蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;DES1B7形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣seromucoid

早期生長(zhǎng)因子檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;MT9C10形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Egr-1

補(bǔ)體因子Ba檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 人膽管癌細(xì)胞;LIPF178C形態(tài)特性: 上皮樣complement factor Ba

ACLY檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;DCBX5B1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣ATP-citrate synthase

臂板蛋白3A檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;8D6形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Semaphorin-3A
正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1積雪草464-92-6中文別名:亞細(xì)亞  

英文名:Asiatic acid  

CAS登錄號(hào):464-92-6

分子式:C30H48O5

分子量:488.70

分子結(jié)構(gòu):

外觀:白色結(jié)晶

規(guī)格:20 mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。

提取來(lái)源:傘形科植物積雪草Centella asiatica 的全草。

溶解性:溶于水、、DMSO,難溶于,。

熔點(diǎn):242-244℃

旋光度:+53.9°()

藥理藥效:本品具有改善抑郁癥、抗癌、防治心肌梗死、腦血栓,腦梗塞,增強(qiáng)記憶,皮膚增白等作用。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 正常前列腺基質(zhì) 永生化細(xì)胞 WPMY-1
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