產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
鴿子源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒 | 50次 | EY00P9524 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
6D-高苯氨酸 98%Human USP20 ELISA Kit
6-L-高苯氨酸乙酯鹽酸鹽 BRHuman USH1G ELISA Kit
海沙瑞林D-高苯氨酸乙酯鹽酸鹽 BRHuman USP22 ELISA Kit
水蛭素(54-65)(脫硫酸鹽)L-高瓜氨酸 BRHuman USHBP1 ELISA Kit
3組素(H3)DL-鹽酸鹽 BRHuman VPS33A ELISA Kit
組素5DL-高瓜氨酸 BRHuman DOK6(Docking protein 6) ELISA Kit
組素-8[血凝反應(yīng)抑制肽]DL-異 98%Human VPS33B ELISA Kit
組蛋白H1-衍生肽DL- 98%Human VPS34(Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3) ELISA Kit
組蛋白H3(1-25)酰L-乙酯鹽酸鹽 99%Human LMNB1(Lamin-B1) ELISA Kit
組蛋白H3(116-136),C116-136L-叔 99%Human VPS35(Vacuolar protein sorting-associated protein 35) ELISA Kit
組蛋白H3(116-136),N15-39DL-叔 98%Human VPS37A ELISA Kit
人體免疫缺陷病1型及2型蛋白酶底物L(fēng)-甲酯鹽酸鹽 98%Human VPS11 ELISA Kit
人體免疫缺陷病-1膜蛋白gp41(1-23)酰(隔離種群BRU/JRCSF)DL-賴氨酸 99%Human VPS39 ELISA Kit
人體免疫缺陷病-1膜蛋白gp120(278-292)(BH10, BH8,HXB2, HXB3, PV22菌株)D- 99%Human VPS15 ELISA Kit
人體免疫缺陷病-1(137-154)D-甲酯鹽酸鹽 98%Human VPS41 ELISA Kit
鴿子源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒紡錘體蛋白2(SPIN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氯離子(Cl-)標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
穩(wěn)定素2(STAB2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氯離子標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/mL,基體:水) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
突觸融合蛋白4(STX4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鉺標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
突觸融合蛋白5(STX5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氟標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00μg/g,基體:0.1MH3BO3,K+2.2mg/L,Na+23mg/L,Ce-37mg/L) 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)
突觸融合蛋白6(STX6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)金標(biāo)準(zhǔn)溶液(100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液) 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
突觸融合蛋白7(STX7)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鉿標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) 質(zhì)量規(guī)格:
突觸融合蛋白8(STX8)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)銥標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基質(zhì):2.0mol/L鹽酸) 質(zhì)量規(guī)格:>75.0%(GC)
突觸融合蛋白1B(STX1B)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)錳標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000mg/L,溶劑:1%硝酸) 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)