細(xì)胞名稱 胚肺細(xì)胞系;KuMA
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C7
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
胚肺細(xì)胞系;KuMA | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63686 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Palmatine
CAS No.:3486-67-7
中文名:巴馬亭
分子式:C21H22NO4
猴棗 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素α3(PCDHα3) 規(guī)格: 30mg
訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素α4(PCDHα4) 規(guī)格: 100mg
蝶啶 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素α5(PCDHα5) 規(guī)格: 50mg
三棱 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素α6(PCDHα6) 規(guī)格: 1g
八角 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素α7(PCDHα7) 規(guī)格: 2g
膽木 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素α8(PCDHα8) 規(guī)格: 5g
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4'羥基 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素β1(PCDHβ1) 規(guī)格: 10mg/支
克拉 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素β10(PCDHβ10) 規(guī)格: 100mg
五指柑 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素β11(PCDHβ11) 規(guī)格: 5g
維生素D3 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素β12(PCDHβ12) 規(guī)格: 100mg
砜 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素β13(PCDHβ13) 規(guī)格: 50mg
托芬那 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素β14(PCDHβ14) 規(guī)格: 100mg
頭孢羥芐 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素β15(PCDHβ15) 規(guī)格: 100mg
訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素β16(PCDHβ16) 規(guī)格: 100mg
門(mén)冬鎂 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素β2(PCDHβ2) 規(guī)格: 25mg
漆姑草 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素β3(PCDHβ3) 規(guī)格: 1g
籬欄網(wǎng) 訂購(gòu)|咨詢 原鈣黏素β4(PCDHβ4) 規(guī)格: 2.5g
MAP3K14/NFkB Inducing Kinase NIK 絲裂原活蛋白激酶3K14抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Nicorandil
Cullin 5/CUL5 血管加壓素激活鈣啟動(dòng)受體蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Nicotinic acid
AQP8/Aquaporin 8 水通道蛋白8抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Rifampicin
SLC26A4 單獨(dú)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC26A4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Rifampicin
Granzyme K 顆粒酶K抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Epsilon Polylysine
SRGN/Chondroitin sulfate proteoglycan core protein 軟骨素多糖核心蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Promestriene
1433 zeta/delta 1433 protein ζ/δ抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Bosentan hydrate
AIFM3 凋亡誘導(dǎo)因子3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Bosentan hydrate
三二鐵 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Iron(III)oxide 含量:CP,98%
三二銪 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Europium(III)oxide 含量:AR
三撐二 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:TED 含量:GR,19.3%
三 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Triethanolaminehydrochloride 含量:CP
三基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:TEP 含量:高純,97%
三基亞酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Triethylphosphite 含量:CP,98%
三四六 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:TTHA 含量:BR,1Mm/L
三異辛基 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Triisooctylamine 含量:高純,98%
三正丁基膦 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:TBUP 含量:CP
色酚ASMX 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:NaphtholASMXphosphate 含量:AR,99.5%
胚肺細(xì)胞系;KuMA改良磷鹽緩沖液(PBS)規(guī)格:10ml*20支/包用途:用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌增菌培養(yǎng)
半固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂規(guī)格:250g用途:用于飼料中沙門(mén)氏菌血清學(xué)鑒定培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
改良Skirrow氏肉湯規(guī)格:FBP溶液用途:1ml每支含量
1%吐溫80-玉米瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于白色念珠菌產(chǎn)芽管試驗(yàn)
7.5%化鈉肉湯顆粒規(guī)格:225ml/袋*10用途:用于金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液規(guī)格:250g用途:用于飲用水,水源水中總大腸菌群的測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))