公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63659 |
細(xì)胞名稱 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1
形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: Vero-HCV-E1細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的E1基因,能穩(wěn)定表達(dá)E1蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室于2008年構(gòu)建并保存。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況: C23
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
11-Hydroxycodaphniphylline
CAS No.:1186496-68-3
中文名:
分子式:C30H47NO4
2金剛 訂購(gòu)|咨詢 前動(dòng)力蛋白2(PK2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
伏格列波糖 訂購(gòu)|咨詢 前動(dòng)力蛋白2(PK2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
訂購(gòu)|咨詢 前動(dòng)力蛋白2(PK2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
扁桃 訂購(gòu)|咨詢 前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1) 規(guī)格: HPLC≥98%;100mg
黃芪中分離物 訂購(gòu)|咨詢 前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1) 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg
阿多弗林 訂購(gòu)|咨詢 前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
喬松素 訂購(gòu)|咨詢 前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
異芒果苷 訂購(gòu)|咨詢 前動(dòng)力蛋白受體2(PKR2) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
槐角苷 訂購(gòu)|咨詢 前列環(huán)素(PGI2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
野靛 訂購(gòu)|咨詢 前列腺干細(xì)胞抗原(PSCA) 規(guī)格: HPLC≥99%;20mg
新補(bǔ)骨脂異黃 訂購(gòu)|咨詢 前列腺六跨膜表皮抗原2(STEAP2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
蒽醌 訂購(gòu)|咨詢 前列腺抑制肽(PIP) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
3β氧基7,25甘遂二24 訂購(gòu)|咨詢 前列腺轉(zhuǎn)谷酰酶(TGM4) 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg
3,4,5三??鼘?訂購(gòu)|咨詢 前列腺素D2(PGD2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
澳洲茄 訂購(gòu)|咨詢 前列腺素D2合成酶(PGD2S) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
桑皮苷A 訂購(gòu)|咨詢 前列腺素D合酶(PTGDS) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
人參皂苷Ro 訂購(gòu)|咨詢 前列腺素E1(PGE1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
槲皮素7O葡萄糖苷 訂購(gòu)|咨詢 前列腺素E2(PGE2) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
CKAP4 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Hydrocortisone
CRISP3 富含半胱分泌蛋白3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ibutilide fumarate
CKMT/Creatine kinase MT 性型線粒體肌激酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ibutilide fumarate
SCRO/DCUN1D1 鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Isepamicine Sulphate
DDX53/CT26 腫瘤/抗原26抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Bexarotene
DEPDC1 細(xì)胞周期調(diào)控蛋白SDP35抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Bexarotene
ENTPD5/CD39L4 原癌基因CD39樣蛋白4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ketoprofen
EST1A 端粒酶結(jié)合蛋白EST1A抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ketoprofen
馬來那敏 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Chlorpheniraminemaleate 含量:USP級(jí),4400u/mg
馬來二丁酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:DBM 含量:CP
馬來二甲酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Dimethylmaleate 含量:BR,95%
馬來 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Maleicacid 含量:USP級(jí),50萬u/g
馬來羅格列 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Rosiglitazonemaleate 含量:BR
馬來 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Maleicacidsodiumsalt 含量:BR,97%
馬栗樹皮苷 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Esculinsesquihydrate 含量:AR,98%
馬鈴薯淀粉 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Starchfrompotato 含量:超純,99%
馬鈴薯浸出粉 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Potatoextract 含量:超純,98%
馬尿L 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:HippurylLphenylalanine 含量:BR,98%
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1玫瑰紅鈉瓊脂規(guī)格:BR250g詳情介紹
改良纖維二糖--瓊脂基礎(chǔ)(MCPC)規(guī)格:纖維二糖詳情介紹
艾格瓊脂規(guī)格:250g用途:用于過程中無菌監(jiān)測(cè)
性蛋白胨水顆粒規(guī)格:250g用途:用于霍亂弧菌選擇性增菌培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))
品紅亞硫鈉瓊脂平板(9cm)規(guī)格:10個(gè)/包用途:用于飲用水、水源水中總大腸菌群的選擇性分離和確證
瓊脂培養(yǎng)基N(化十六基三瓊脂)規(guī)格:250g用途:用于綠膿假單胞菌的分離培養(yǎng)
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。