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規(guī)格參數(shù)：

資源名稱: 褐球固氮菌

種屬: Azotobacter chroococcum

分離基物: 土壤

提供形式: 凍干物

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 研究；。固氮菌，細(xì)菌肥料。

培養(yǎng)基: 固氮培養(yǎng)基(Azotobacter Medium)：酵母提取物 0.5g， 20.0g，KH2PO4 0.2g，K2HPO4 0.8g，MgSO4.7H2O 0.2g，CaSO4·2H2O 0.1g，F(xiàn)eCl3 微量，Na2MoO4·2H2O 微量，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.2。

生長(zhǎng)條件: 25~28℃，好氧。

生長(zhǎng)特性: 卵圓形細(xì)胞，Gˉ ，常成對(duì)。周生鞭毛運(yùn)動(dòng)，無(wú)芽孢。好氧，化能異養(yǎng)型。接觸酶陽(yáng)性。利用淀粉、。能利用鹽、氨和氨基酸作為氮源。在含一種有機(jī)碳源的無(wú)氮培養(yǎng)基中能固定分子氮。

存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

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低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng)：
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。
⑵ 霉菌孢子的制備　
霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備　
搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備　
種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。
Yarrowia│lipolytica 中文名稱：解脂耶氏酵母Yarrowia│lipolytica提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:石油發(fā)酵制檸檬及異檸檬。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：≥98%

Aspergillus│candidus 中文名稱：白曲霉Aspergillus│candidus提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:釀酒糖化菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0076生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：98%

Monascus│anka 中文名稱：紅曲紅曲菌Monascus│anka提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:紅色素。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0085生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：98%

Lactobacillus│Coryniformis subsp. coryniformis 中文名稱：棒狀乳桿菌棒狀亞種Lactobacillus│Coryniformis subsp. coryniformis分離基物:泡菜(蘿卜,豇豆,白菜,黃瓜)提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:泡菜、乳制品、果蔬制品等。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0006生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：99%

Lactobacillus│salivarius subsp. salicinuus 中文名稱：唾液乳桿菌楊素亞種Lactobacillus│salivarius subsp. salicinuus分離基物:泡菜（蘿卜，木瓜）提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:發(fā)酵泡菜、果蔬制品、飼料等。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0006生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：99%

Lactobacillus│viridescens 中文名稱：綠色乳桿菌Lactobacillus│viridescens分離基物:泡菜(木瓜,黃瓜,蘿卜,苦耳瓜)提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:發(fā)酵制泡菜、果蔬制品、飼料等。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0006生長(zhǎng)條件:30~32℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：99%

Propionibacrium│jensenii 中文名稱：詹氏丙桿菌Propionibacrium│jensenii分離基物:窖泥提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)丙,釀酒、降酯用。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0286生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：98%

Saccharomyces│ellipsoideus 中文名稱：橢圓酵母Saccharomyces│ellipsoideus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:甘油。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：1.00mg/ml
褐球固氮菌說(shuō)明書(shū)MR-VP培養(yǎng)基人表皮角質(zhì)細(xì)胞-新生原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑AGEs cool article(advanced glycosylation end products cool article)  晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對(duì)照品

察氏培養(yǎng)基人表皮角質(zhì)細(xì)胞-原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑ET-1(Endothelin-1)  內(nèi)皮素-1（蛋白多肽 活性蛋白）

結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂VRBA人表皮角質(zhì)細(xì)胞-胎兒原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑GRGDS peptide  粘附多肽GRGDS

結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂人表皮黑色素細(xì)胞-淺色素原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑PACAP(1-38 Peptide)  腺苷環(huán)化酶激活肽 1-38（全蛋白）

產(chǎn)培養(yǎng)基人表皮黑色素細(xì)胞-中色素原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑MBP(Myelin Basic Protein, MBP 68-86)  髓鞘性蛋白(多肽抗原)

西蒙氏枸櫞鹽瓊脂人表皮黑色素細(xì)胞-深色素原代表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Bursin  囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽

腸道菌計(jì)數(shù)瓊脂（VRBDA)人表皮黑色素細(xì)胞-原代系膜細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑NPY ( Neuropeptide Y)1-36  神經(jīng)肽 Y（1-36多肽）

菌種保存培養(yǎng)基人表皮黑色素細(xì)胞-胎兒原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Leupeptin   亮抑酶肽
綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
（1）前期準(zhǔn)備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；
（2）按比例配制培養(yǎng)材料；
（3）導(dǎo)入曝氣，進(jìn)行繁殖培養(yǎng)；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；
（5）分離并檢測(cè)；
（6）取液儲(chǔ)存；通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng)，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。