綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
乳酸片球菌規(guī)格 | Pediococcus acidilactici | EY-J963215 |
資源名稱(chēng): 乳酸片球菌
種屬: Pediococcus acidilactici
分離基物: 發(fā)酵牦牛乳
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 酸奶
培養(yǎng)基: MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g, 2.0 g,錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾水 1000mL。pH6.2±0.2。
生長(zhǎng)條件: 37℃,兼性厭氧,3d
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線(xiàn)菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線(xiàn)菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線(xiàn)菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線(xiàn)菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱(chēng)為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱(chēng)為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱(chēng)為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱(chēng)為四級(jí)發(fā)酵。
Serratia liquefaciens 中文名稱(chēng):液化沙雷氏菌Serratia liquefaciens提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:分類(lèi)學(xué)研究,質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:≥98% (HPLC)
Aspergillus nigerCMCC(F) 98003 中文名稱(chēng):黑曲霉 Aspergillus nigerCMCC(F) 98003模式菌株:未知應(yīng)用領(lǐng)域:0.5~1.0×10³cfu/顆 1顆/支 純度:≥98% (HPLC)
Cryptococcus│albidus 中文名稱(chēng):淺白隱球酵母Cryptococcus│albidus分離基物:復(fù)合飼料提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:飼料用。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
Torulopsis│globosa 中文名稱(chēng):球擬圓酵母Torulopsis│globosa提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:食用酵母。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
Candida│gelidadi 中文名稱(chēng):凍膠假絲酵母Candida│gelidadi分離基物:酒曲提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于曲酒增香。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
Torulopsis│dattila 中文名稱(chēng):棗椰球擬酵母Torulopsis│dattila提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:以糖蜜為原料發(fā)酵酒精。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
Saccharomyces│chevalieri 中文名稱(chēng):薛瓦酵母Saccharomyces│chevalieri分離基物:蘋(píng)果李子提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:釀造李子酒。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:95%
Candida│lipolytica var. lipolytica 中文名稱(chēng):解酯假絲酵母解酯變種Candida│lipolytica var. lipolytica提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:石油發(fā)酵制檸檬及異檸檬。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長(zhǎng)條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:95%
乳酸片球菌規(guī)格營(yíng)養(yǎng)肉湯(NB)人星形膠質(zhì)細(xì)胞原代上皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基A Beta1-40 (H-3-me6;H-3-me13;H-3-me14; Beta-Amyloid 1-40) β淀樣肽1-40(結(jié)構(gòu)改造)
營(yíng)養(yǎng)肉湯(NB)人星形膠質(zhì)細(xì)胞原代內(nèi)皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基A Beta29-40( Beta-Amyloid 29-40) β淀樣肽29-40(野生型)
營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)人星形膠質(zhì)細(xì)胞原代平滑肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基A Beta29-42( Beta-Amyloid 29-42) β淀樣肽29-42(野生型)
營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞原代成纖維細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Beta-Amyloid (1-42) β淀樣肽(1-42)
乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞原代心肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β淀樣肽25-35(多肽)
乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基人海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞原代表皮角化細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Beta-Amyloid 1-42 CT β淀樣肽 1-42 (C端多肽)
乳糖復(fù)發(fā)酵培養(yǎng)基(乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基)人腦干星形膠質(zhì)細(xì)胞原代系膜細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Amylin 糖尿病相關(guān)肽(胰島淀樣肽)
乳糖復(fù)發(fā)酵培養(yǎng)基(乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基)人中腦星形膠質(zhì)細(xì)胞原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基APP695-770 (Amyloid protein precursor) 淀樣肽前體蛋白(多肽抗原)